标准解读-TSHRH 031-2020 化妆品紧致、抗皱功效测试-体外成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白含量测定

随着人们对美容护肤需求的不断提升，紧致、抗皱类化妆品成为了市场上的热门产品。然而，如何科学、准确地评估这些产品的功效，一直是行业关注的焦点。今天，我们将为大家解读一项重要的团体标准——T/SHRH 031-2020，该标准详细规定了化妆品紧致、抗皱功效的体外测试方法，特别是通过测定成纤维细胞中Ⅰ型胶原蛋白的含量来评估产品的功效。

一、标准背景与意义

T/SHRH 031-2020是由上海日用化学品行业协会发布的团体标准，旨在为化妆品行业提供一种科学、可靠的体外测试方法，用于评估化妆品原料及成品的紧致、抗皱功效。

该标准通过测定人真皮成纤维细胞中Ⅰ型胶原蛋白的含量，来判断化妆品是否具有促进胶原蛋白合成的能力，从而为产品的功效宣称提供科学依据。

二、什么是Ⅰ型胶原蛋白

Ⅰ型胶原蛋白是真皮细胞外基质的主要成分之一，由真皮成纤维细胞合成并分泌。它在维持皮肤弹性、紧致度方面起着至关重要的作用。随着年龄的增长，胶原蛋白的合成逐渐减少，导致皮肤出现松弛、皱纹等问题。因此，促进Ⅰ型胶原蛋白的合成是许多抗衰老化妆品的核心功效之一。

三、测试原理与方法

1. 测试原理

该标准采用酶联免疫吸附测定（ELISA）的方法，通过检测成纤维细胞分泌的Ⅰ型胶原蛋白含量，来评估化妆品原料或成品是否具有促进胶原蛋白合成的功效。

Ⅰ型胶原蛋白与包被在酶标板上的抗体特异性结合。通过酶催化反应生成有色产物，Ⅰ型胶原蛋白的含量与有色产物的颜色深浅呈正相关。使用酶标仪在450 nm波长下测定光密度（OD值），从而计算出Ⅰ型胶原蛋白的含量。

2.测试步骤 

-细胞准备：使用人真皮成纤维细胞作为测试模型，细胞接种密度应保证在24小时后融合度达到45%-60%。

-受试物准备：将化妆品原料或成品溶解在适当的溶剂中，确保无细胞毒性。

-给药与培养：将受试物加入细胞培养板中，培养24小时后收集细胞上清液。

-ELISA检测：使用人Ⅰ型胶原酶联免疫试剂盒进行检测，测定Ⅰ型胶原蛋白的含量。

四、结果计算与有效性验证
1.结果计算

通过标准曲线计算出Ⅰ型胶原蛋白的含量，并计算受试物与空白对照的上调率。上调率公式如下：

上调率=(T/C-1)x100%

其中，T为受试物组的Ⅰ型胶原蛋白含量，C为空白对照组的含量。

2. 有效性验证

(1) 阳性对照：每次试验需设置阳性对照，阳性对照的Ⅰ型胶原蛋白含量上调率应≥20%。

(2)平行性验证：各组复孔间的光密度变异系数（C.V）应≤20%，确保试验的平行性。

五、标准的意义与应用
T/SHRH 031-2020为化妆品行业提供了一种科学、可靠的体外测试方法，能够有效评估化妆品原料及成品的紧致、抗皱功效。通过测定Ⅰ型胶原蛋白的含量，企业可以更加准确地验证产品的功效，并为产品的市场宣称提供科学依据。